河豚毒素检测试剂盒实验验证

       武汉英科生物技术有限公司开发的河豚毒素ELISA检测试剂盒，检测限量达到2 ppb,在美国、日本、俄罗斯、北欧等食品企业、政府检验机构广为应用，质量合格率达到100%误差1%左右，大量的实验数据表明，河豚毒素检测试剂盒技术水平国际一流水平。

       与LC-MS仪器对比试验，结果符合率100%批间差异小于0.1%<,试剂盒稳定高，抗干扰力强。

1.  ELISA标准工作曲线

      按照竞争性ELISA操作过程，对不同稀释度的河豚毒素标准液进行测定，以各孔平均OD值与对照组的OD值比值的logit函数为纵坐标，以不同浓度河豚毒素标准品浓度的对数为横坐标，绘制出标准曲线。结果如图所示：线性回归方程为y＝-1.9695x＋3.3899，R²＝0.9902；线性范围为5-500 ng/mL，最低检测限为5 ng/mL。

图1  ELISA标准工作曲线（纵坐标不是抵制率logit(B/B0)）

2.   回收率实验

      添加250 ng和500 ng的河豚毒素标准品的1 g河豚鱼鱼肉中，通过竞争性ELISA检测结果如表所示：添加250 ng标准品时，回收率为159%，添加500 ng标准品时，回收率为108%。产品回收率偏高，我们分析可能是由于洗板次数太多，导致少量的抗体抗原脱离，或者是由于实验时间偏长，抗体的效价减弱引起。产品回收率偏高，不影响检测灵敏度，由于产品检测限较低(5 ng/mL)，所以该产品可以满足日常对河豚鱼的检测工作要求。

4.   样品中河豚毒素的检测

         方法依据：GBT 5009.206-2007 鲜河豚鱼中河豚毒素的测定

         m:检测样品的质量，单位为克（g）

       关于河豚鱼的毒性,一般分为4个毒力等级:毒性高于1000 MU/g为剧毒级;介于100 MU/g～1000 MU/g之间为强毒级;介于10 MU/g～100 MU/g之间为弱毒级;低于10 MU/g为无毒级(无毒级中使小鼠致死的情况可视为微毒级)。据张理对鼠单位的定义 (1 MU=0.22 μg)。